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烟酰胺没有必须晚上使用的硬性规定，但晚上使用更利于皮肤修复和吸收。
夜间是皮肤代谢和修复的活跃时段，此时使用烟酰胺能更好地发挥其修护屏障、淡化色素的作用。白天皮肤主要应对紫外线和环境污染，而夜晚环境相对稳定，没有日晒压力，烟酰胺在无紫外线干扰下更稳定，不易因氧化而降低活性。许多人在晚间护肤流程中加入含烟酰胺的产品，发现皮肤状态改善更明显，干燥和泛红问题减轻更快。
白天使用烟酰胺也安全，但需配合防晒措施。部分人担心白天使用会光敏，实际上烟酰胺不具光敏性，反而能增强皮肤抵抗力。但为避免外界刺激叠加，建议夜间使用以获得更温和持续的效果。家庭护肤中，可根据个人作息灵活安排，重点在于坚持和搭配保湿产品，让皮肤在安静环境中充分吸收营养。
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