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新鲜柠檬片建议冲泡时间不超过4小时，干柠檬片不超过8小时。
新鲜柠檬切片后接触热水，维生素C在60℃以上会快速氧化，2小时内损失率达30%。果肉中的柠檬苦素随浸泡时间延长逐渐释放，超过4小时会使水变苦涩。使用带皮柠檬片时，果皮油脂中的柠檬烯超过6小时可能析出刺激性成分，引发肠胃不适。建议每杯水放入2-3片柠檬，20分钟内饮用完毕风味最佳。
干柠檬片因脱水处理，细胞结构破坏更易溶出物质，但久泡会流失香气物质。密闭容器中冷藏保存的柠檬水需在12小时内饮用完毕，避免细菌滋生。冲泡时水温控制在50-60℃能平衡营养保留和口感，沸水冲泡会加速营养流失。若发现柠檬片边缘发黏或水液浑浊，应立即停止饮用。反复续水冲泡同一批柠檬片不宜超过3次，否则可能摄入果核释放的微量毒素。
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