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柠檬片通常可冲泡2-3次。
新鲜柠檬片在60℃温水中的有效成分释放高峰为前两次冲泡。首次冲泡15分钟可析出70%的维生素C和类黄酮，第二次冲泡释放剩余20%的营养物质，第三次仅能提取不足10%。切片厚度影响释放效率，1-2毫米薄片比厚切片的溶出率高40%，但冲泡次数相应减少。保留果皮的柠檬片因含更多精油成分，可比去皮片多冲泡1次。
冲泡后的柠檬片建议8小时内用完。室温存放超过4小时易滋生细菌，冷藏可延长至24小时但风味下降。反复冲泡虽能保留部分柠檬酸，但果肉纤维会逐渐水解产生苦味物质。肠胃敏感者饮用3次以上的柠檬水可能引发不适，因持续摄入果胶和柠檬苦素会刺激肠道。每次冲泡后建议挤压果肉，促使细胞壁破裂释放更多活性成分。
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