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柠檬片泡水不建议过夜饮用，冷藏保存不超过12小时。
新鲜柠檬片浸泡超过8小时后，果肉中的糖分和果胶易成为细菌培养基，室温环境下可能滋生大肠杆菌或霉菌。柠檬皮中的柠檬苦素随时间延长逐渐溶出，使水产生苦涩味。维生素C在氧化作用下大量流失，放置12小时后含量下降约60%。金属容器浸泡会导致柠檬酸与金属离子反应，产生轻微沉淀物。
若需保存，应将柠檬水过滤后密封冷藏，温度控制在4℃以下。玻璃容器比塑料更不易吸附味道，建议去除柠檬籽减少异味。饮用前观察液体是否浑浊，轻微絮状物出现应立即丢弃。隔夜柠檬水加热至70℃可杀菌，但高温会破坏剩余营养成分。浸泡超过24小时的柠檬片可能释放微量香豆素，长期饮用影响肝脏代谢功能。
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